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包埋法最新娱乐体验_包埋法有哪些方法?其原理是什么?(2024年12月深度解析)

内容来源：云川SEO所属栏目：话题更新日期：2024-12-02

包埋法

2024年TEM制样技术大揭秘！材料科学家们都知道，透射电子显微镜（TEM）是通过电子成像来分析材料结构的神奇工具。然而，由于电子的穿透能力较弱，样品的厚度、导电性、磁性以及分散性都会直接影响测试结果。因此，制备高质量的TEM样品至关重要。 𐟔砨𝽦 𗥷奅𗥤福�˜ TEM常用的载样工具是样品杆，它们通常制成杆状。不同的测试需求需要不同类型的样品杆，样品搭载在支撑网（通常是铜网）里，并放在样品杆的前端。每个样品杆最多只能放1~2个铜网。支撑网的材质有多种，如铜、镍、铍和尼龙等，选择时要特别注意避免成分干扰。 𐟧ꠦ 𗥓要求粉末样品：主要用于观察粉末材料的形貌、测定颗粒度以及进行结构与成分分析。薄膜样品：观察样品内部的组织、结构、成分、位错组态和密度、相取向关系等。表面复型和萃取复型：用于金相组织观察、断口形貌、形变条纹、第二相形态、分布和结构等。一般要求：样品厚度小于100 nm，不会被电镜电磁场吸出，在高真空中能保持稳定，不含有水分或其他易挥发物。 𐟓ˆ 制样方法粉末样品制样方法溶液分散-滴落法：适用于纳米颗粒材料或其他体积小的样品。胶粉混合法：一般用于磁性粉末样品且观察倍数不高的情况。块状样品制样方法树脂包埋法：适用于大的块体材料，需要切割成小块后进行磨薄工艺。机械减薄法：通过机械研磨来减少样品厚度。超薄切片法：多用于生物组织、高分子和无机粉体材料等。离子减薄法：用于机械减薄后的最终变薄步骤。电解抛光减薄法：通过电化学作用使试样磨面平整、光洁，操作简单、快速且低成本。 TEM制样技术不断发展，为材料科学研究提供了强有力的支持。掌握这些制样方法，你将能够更准确地理解材料的微观结构，推动科学进步！

冰冻切片冰晶和组织破碎的解决方法冰冻切片在科研和病理诊断中的应用越来越广泛，但高质量的免疫组化染色效果受多种因素影响。许多人在做冰冻切片时经常遇到冰晶和组织破碎的问题，下面是一些解决方法：快速冷冻保存：组织离体后应尽快进行冷冻保存，擦干表面血渍，避免PBS冲洗，包埋时尽量防止气泡产生。使用专用包埋模具：使用专用的OCT包埋模具，避免组织不规则周边有突出部分，影响切片组织的完整性。固定样品托：确保样品托牢固固定，避免切片时出现移动。切片技巧：切片时要先慢后快，先慢是为了减小刀片的切力，使组织片不容易卷曲，后快是为了使所切的组织片远离刀片边缘，使得贴片容易。多次切片：对于有特殊切面的样本，尽量一次性多切几张，每一次切片对组织都有损耗，反复冻融保存不当会影响后续组织形态。防冰晶方法：单纯OCT胶包埋法：将新鲜组织冰冻迅速置于包埋托上，再将组织的表面全部用进口OCT胶包后放入低温切片机内冷冻5分钟左右切片。高渗透压脱水法：将固定过的组织取材后置于10%~30%的梯度蔗糖溶液中，置4℃冰箱过夜，待组织块沉底后，取出，用OCT胶包埋切片。低温骤冷法：将组织块置入低温环境中，使组织骤然降温。本实验室采用的是液氨骤冷，即将新鲜取材的组织迅速置于液氨罐内10~30秒取出，OCT胶包埋后置于低温切片机内待其复温至-20℃左右即可切片。通过以上方法，可以有效解决冰冻切片中冰晶和组织破碎的问题，提高免疫组化染色效果。

在家自制酸奶：让家人享受健康美味 𐟥›酸奶的制作其实是一个复杂的微生物发酵过程，需要一定的时间，并不是简单的化学反应。所以，请您耐心等待这个奇妙的过程吧～牛奶的选择𐟥› 选择适合做酸奶的牛奶非常重要。推荐使用纸盒装的全脂纯牛奶，比如蒙牛、伊利等大牌牛奶，成功率很高。蛋白质和脂肪含量最好在100ml/3.2g以上。不推荐的牛奶类型包括：有机奶、高钙奶、低脂奶、脱脂奶、早餐奶、奶饮品、饮料、散装牛奶、冰鲜奶、塑料袋装奶等，这些牛奶失败的概率较高。牛奶的品质𐟥› 牛奶的品质肉眼是看不见的，但通过发酵，酸奶可以检测到牛奶的品质。好的牛奶做出来的酸奶一定是光洁、香浓的。如果牛奶中含有过多的抗生素，做出来的酸奶也不会很好。菌种的活性和保质期𐟕𐯸 菌种的活性和保质期对于酸奶的成功制作非常重要。包埋法是目前益生菌普遍使用的保活方法，通过将优势菌种包埋在多孔载体内部或高聚物形成的凝胶中，达到饱和的目的。菌粉冷冻保存的保质期为18个月，常温阴凉下可以保存12个月。如果有条件的家庭，建议将菌种放在冷冻层保管。发酵时间⏰ 不同季节的发酵时间不同：春季和秋季：需要10-12个小时夏季：需要8-10小时冬季：需要12-16个小时制作步骤：清洗并开水冲烫酸奶机内胆。没有酸奶机的可以利用家里的保温杯，但一定要记住，内胆一定要开水冲烫。倒入牛奶（500ml）+菌粉（1条）+适量糖（6%），无糖爱好者也可以不放糖。搅拌均匀后盖盖通电发酵。夏季8-10小时，冬季12-16小时。坐等美食吧！建议使用全脂纯牛奶，不建议脱脂低脂牛奶。做好的酸奶可以立即食用，也可以放入冰箱冷藏数小时后风味更佳。酸奶发酵粉推荐✔️✔️✔️✔️ 佰生优酸奶发酵菌是市场上最好的酸奶发酵菌，是唯一拥有自己专利的自制酸奶发酵菌公司。佰生优的酸奶发酵菌经得起检验，1g酸奶发酵菌最多可以发酵3-4L纯牛奶，发酵速度快、酸奶状态好、口感好。10菌的比较顺滑，5菌的是经典型。想知道更多关于酸奶制作的小技巧，欢迎留言一起探讨𐟓꯼

文献解读｜黑色素瘤类器官构建及免疫疗法评估

𐟔젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色全攻略：步骤与技巧苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-Eosin staining），简称HE染色法，是切片技术中常用的染色方法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 𐟧ꠥꌦ�꤯𜚊取样固定取新鲜的组织样品，加入4%多聚甲醛组织固定液的EP管中。取样材料应该小而薄，约黄豆粒大小。脱水采用梯度酒精浓度法脱水。通常选择50%-60%-70%-90%-95%-100%的浓度梯度，各酒精浓度要求准确。95%以前各步骤脱水1小时，95%和100%均分为两步进行，分别脱水30分钟。实验中常将组织在后一步的95%的酒精溶液中过夜，以便进行脱脂。透明浸蜡为了使石蜡更容易进入组织，要对脱水后的组织进行透明处理。将组织依次浸入二甲苯:无水乙醇(1:1)溶液和二甲苯透明样品各30分钟，然后在60℃的石蜡溶液中充分浸泡2小时。包埋和切片通过包埋机，将浸泡后的组织块使用蜡液包埋后，放到冷台上凝固。之后使用刀片进行修整，在切片机上固定好后进行连续切片（5um）。所得的切片用银子在42℃温水中展开，之后固定在载玻片上，经40Ⰳ烘干后进行HE染色。 HE染色 HE染色的程序如下：浸入二甲苯ⅠⅡ，95%酒精，90%酒精，80%酒精，70%酒精各15分钟。二甲苯:100%酒精(1:1)，100%酒精Ⅰ，50%酒精，蒸馏水各2分钟。苏木精染液5-10分钟，水洗后分化入1%盐酸酒精5秒，自来水10分钟。 1%氨水蓝化，自来水，50%，70%，80%，90%和95%酒精各2分钟。伊红染液5分钟，95%酒精，100%酒精ⅠⅡ，100%酒精:二甲苯(1:1)，二甲苯I、各2分钟。中性树脂封片，不应该等切片上的二甲苯干了再封固。通过以上步骤，即可完成HE染色，观察到细胞核和细胞质的清晰染色效果。

𐟌Ÿ优博法版剖蓓舒：断奶期的最佳选择𐟌Ÿ 为什么选择优博法版剖蓓舒呢？𐟤” 让我们来看看它的优势吧！ 𐟍𜠦𓕥›𝥎Ÿ装原罐：确保最新鲜的高油乳清粉生产，法国圣元工厂是高油乳清粉的最大供应商。 𐟍𜠩똦𒹤𙳦𘅧𒉤𜘤𚎧”Ÿ牛乳：采用微胶囊包埋技术，去除生牛乳中的矿物盐，制成新鲜的脱盐乳清，再加入植物油和珍贵的稀奶油（富含天然的OPO结构脂，亲和母乳）。 𐟍𜠤𛿧”Ÿ母乳配方：乳清蛋白与酪蛋白的比例达到70:30，是业内最高的，无限接近母乳。 𐟍𜠨奅𛤸𐥯Œ：每听900g重，含有900mg乳铁蛋白和90亿活性益生菌Bi-07。优博法版剖蓓舒是断奶期的理想选择，为宝宝提供最接近母乳的营养。𐟑𖰟𜀀

透射电镜样品制备的五种常见方法 𐟌Ÿ与扫描电镜样品制备相比，透射电镜样品制备更为复杂和细致。以下是几种常见的透射电镜样品制备方法： 1️⃣ 溶液分散-滴落法将样品颗粒分散在溶液中，使用超声机使其均匀分散。然后，用吸管或移液枪将液体滴在直径为3mm的微栅或支撑膜上，待溶剂挥发后完成制样。 2️⃣ 机械减薄法根据样品情况，机械减薄法可分为需要包埋和不需要包埋两种。将样品分散在未凝固的包埋胶中，待其凝固后切成符合透射电镜样品杆尺寸的薄片。然后，通过手工研磨和抛光机去掉表面划痕，再用离子减薄仪继续减薄，直到获得一定面积的薄区和数十纳米厚的试样。 3️⃣ 离子减薄利用Ar离子轰击样品，通过调节电压和电流达到减薄样品的目的。常用的离子减薄设备包括PIPS、Ion Mill、Nano Mill、Ion Slicer等。 4️⃣ 超薄切片超薄切片制样方法直接、快速且简便，特别适用于观察特定取向的样品。但不适用于金属和其他延展性较好的试样。 5️⃣ 聚焦分子束切割法这种方法普适性强，可同时利用电子束和离子束对试样进行成像，定位方便。还可以利用离子束减薄试样，直接获得可用于透射电镜观测的试样。 𐟔以上是几种常见的透射电镜样品制备方法，每种方法都有其独特的优势和适用范围。在实际操作中，需要根据具体样品和实验需求选择合适的方法。

尼氏染色法：探索神经元的秘密尼氏染色法（Nissl Staining）是一种用碱性染料染色神经组织的方法。尼氏体是神经元胞质内的一种嗜碱性物质，广泛存在于各种神经元中，不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量都有所不同。通过尼氏染色，可以观察到神经元内的细胞结构，并了解神经元的损伤情况。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。以下是使用甲苯胺蓝染料对小鼠脑组织进行尼氏染色的步骤：将新鲜组织固定在10%中性福尔马林溶液中48小时后，进行常规脱水包埋。切片厚度为6-8，常规脱蜡至水。用蒸馏水冲洗切片。将切片放入Toluidine blue Stain中，将染色缸置于恒温箱50-60Ⰳ侵染25-50分钟。用蒸馏水稍冲洗切片。用70%乙醇冲洗切片。用95%乙醇迅速分化，分化不易控制，如果分化失败，可重复步骤4。用无水乙醇迅速脱水。用二甲苯透明，中性树胶封固。在显微镜下观察并拍照。通过这些步骤，可以观察到神经元内的尼氏体，从而了解神经元的结构和损伤情况。

HE染色全攻略：从取材到封片苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-Eosin staining），简称HE染色法，是切片技术中常用的染色方法之一。这种方法主要用于显示细胞核和细胞质的形态和结构。取材与固定 𐟧ꊩ斥…ˆ，从小鼠心脏取材后，将其置于预冷的PBS中冲洗干净，然后用干净的滤纸吸干水分。接着，将心脏置于4%多聚甲醛内固定至少24小时。脱水与包埋 𐟒犨„𑦰𔦘懲š过一系列乙醇溶液进行的，包括70%乙醇溶液30分钟、80%乙醇溶液30分钟、90%乙醇溶液30分钟、95%乙醇溶液30分钟、无水乙醇60分钟两次、二甲苯60分钟两次，最后是石蜡60分钟三次。脱水结束后，将心脏组织进行石蜡包埋。切片与黏附 𐟔ꊤ𝿧”襈‡片机将石蜡块切成5微米厚的组织切片。为了减少裂痕，可以将组织块放入冰水混合物中浸泡一会儿。每张黏附载玻片上放置3到4个组织切片。脱蜡与染色 𐟌ˆ 脱蜡是通过二甲苯和乙醇的组合进行的，目的是去除石蜡并使水进入组织中。染色过程中，苏木素染色4分钟，自来水冲洗10分钟，盐酸乙醇分化3秒，再次自来水冲洗10分钟（返蓝），伊红染色25秒到1分钟。盐酸乙醇的作用是去除细胞核和细胞浆中多余的染料。再次脱水与透化 𐟒犨„𑦰𔦘懲š过无水乙醇进行的，时间为5分钟三次。透化则是通过二甲苯进行的，时间为10分钟三次。封片与观察 𐟔슦œ€后，使用中性树脂封片，待其自然晾干后即可置于显微镜下拍照观察。注意，苏木素染过可以用盐酸分化使颜色变淡；伊红过染可以用70%乙醇洗使颜色变淡。切片不可在空气中长时间暴露，以免变黑影响观察。通过以上步骤，就可以完成HE染色，观察到细胞核和细胞质的形态和结构啦！

荧光原位杂交样本制备与运输全攻略荧光原位杂交技术是一种非放射性的分子生物学方法，它利用标记了报告分子的核酸探针与染色体或DNA纤维切片上的靶DNA进行杂交。当两者互补时，会形成杂交体，然后通过免疫化学反应检测荧光信号，从而实现对待DNA的定性、定量或相对定位分析。 𐟓栩€样要求包埋：石蜡包埋、OTC包埋动物组织：已固定在4%多聚甲醛中。处死动物后立即取材，生理盐水冲洗表面，4%的多聚甲醛固定，一般组织固定48小时后进行包埋，大小不超过1cm*1cm*0.5cm。装组织的管子要比组织大，固定液是样品体积的5倍以上，以保证充分固定，封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。植物组织：新鲜取材后固定于FAA固定液中。大小不超过1cm*1cm*0.5cm，如果组织悬浮于固定液上，可以抽真空使其下沉。常温或少量冰袋运输。 𐟔ꠥˆ‡片：石蜡切片、冰冻切片石蜡包埋的组织：冰袋运输。 OTC包埋的组织：干冰运输。 𐟎蠦Ÿ“色：脱蜡至水、苏木素染色、伊红染色、脱水封片石蜡切片：石蜡切片码齐装在塑料切片盒中，冰袋运输。冰冻切片：冰冻切片码齐装在塑料切片盒中，干冰运输。 𐟓𘠦‹照：光学拍照(白光)、数字扫描(白光) 已染色的切片，常温或少量冰袋运输。通过以上步骤，可以确保样本的质量和实验的准确性，为荧光原位杂交实验打下坚实基础。

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